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生物素隨機引物DNA標記試劑盒(Biotin Random Prime DNA Labeling Kit)是一種通過隨機引物標記反應產生生物素標記DNA探針的試劑盒。本試劑盒標記的生物素DNA探針可以用于常規(guī)的Northern、Southern、colony或plaque hybridization、dot或slot blot、原位雜交等。
在Klenow酶(Klenow fragment,3'-5'exo-)催化下,通過隨機引物標記反應(random prime labeling)可以把生物素標記的Biotin-11-dUTP摻入到新合成的DNA探針中,這樣就可以產生生物素標記的DNA探針。在隨機引物標記反應過程中,一些標記好的DNA探針可以被Klenow酶從模板DNA鏈上驅趕下來。這樣在模板量較少的情況下,通過隨機引物標記反應,最后可以產生比模板DNA量更多的生物素標記DNA探針,可多達1-15倍左右。
本試劑盒可以用于多種DNA模板的標記,包括DNA片段、線性化的質粒或cosmid、超螺旋DNA等。用于本試劑盒的模板DNA片段應不小于100bp,小于100bp的DNA模板可以使用生物素3'末端DNA標記試劑盒進行DNA探針標記。
用于本試劑盒的模板DNA的量應不少于10ng,推薦的模板用量為100ng-1μg。
本試劑盒中提供了已經用生物素標記好的Biotin-Control DNA,可以用作檢測生物素DNA探針標記效率的對照。
生物素標記DNA可以使用化學發(fā)光法生物素標記核酸檢測試劑盒或其它適當試劑盒進行檢測。
本試劑盒可以用于10個標記反應。 |